Prelevarea materialului biologic urogenital la bărbaţi

Prelevarea materialului biologic urogenital la femei

Una dintre cele mai frecvente patologii neoplazice la femei este cancerul de col uterin. Este a doua cauză de deces a femeilor cu vârste între 15-45 ani, după cancerul mamar. Spre deosebire de alte tipuri de cancer care sunt incurabile, cancerul de col uterin se poate vindeca în majoritatea cazurilor (94%), dacă este descoperit în stadii incipiente, care, însă sunt asimptomatice, ele descoperindu-se numai în cadrul procesului de screening, prin examen citologic Babeș-Papanicolau.

Examenul citologic în mediu lichid sau testul Babeş-Papanicolau, este un test medical care evaluează starea de sănătate a colului uterin prin examinarea la microscop a celulelor recoltate de la acest nivel. Este cel mai important test diagnostic pentru depistarea  displaziei şi a cancerului de col uterin.

Testul Babeș-Papanicolau este o procedură simplă, nedureroasă, care produce un disconfort minor.

Este o metodă de studiu a stării colului uterin și a cervixului, în care celulele prelevate de la nivelul colului uterin sunt introduse într-un recipient cu mediu lichid, care este îmbogățit prin centrifugare vias întinse pe lamă, metoda clasică. După centrifugare, tot materialul de celule recoltat este imprimat pe lamelă, excluzând  pierderea unor celule colectate și deci sensibilitate mai înaltă.

Aceste celule sunt prelevate prin periere de către medicul ginecolog, cu ajutorul unei periuţe special concepute. Ea are o suprafață mare de contact, posibilitatea colectării unimomentane a materialului, iar vârfurile periei urmează conturul cervixului (periile mai lungi, din mijloc, ajung în endocervix, iar periile scurte ajung în zona ectocervicală și în zona de transformare T de unde pot porni anumite tipuri de cancer uterin).

Avantajele citologiei în mediu lichid vs metoda clasică:

• permite o apreciere mai bună a morfologiei celulelor prin etalarea lor în strat subțire pe frotiu;
• evită pierderea de probă recoltată cu 37% (vârful periuței cu care se recoltează rămâne în flacon, rezultând menținerea a 100% celule în probă);
• permite separarea celulelor de sânge, mucus și alte resturi celulare;
• sensibilitatea (RRP - rezultate real pozitive) si specificitatea (RRN – rezultate real negative) sunt crescute pentru depistarea cancerului și leziunilor precanceroase a colului uterin:

ASC-US – crește cu 89,5%

LSIL – crește cu 95,7%

HSIL – crește cu 98,1%

• folosește colorant Papanicolau proaspăt pentru fiecare lamă;
• mediul lichid permite conservarea celulelor în condiții optime, pe o perioadă de 4 săptămâni la temperatura camerei și 6 luni păstrată la 2 – 8 grade C;
• variabilitatea în colorarea nucleului se traduce prin detalii cromatiniene mai clare și mai ușor de interpretat;
• din același recipient se testează atât HPV, BTS cât și teste ICC.

Cine și când trebuie să efectueze testul Babeș-Papanicolau?

• Testul Babeș-Papanicolau este recomandat tuturor femeilor începând de la vârsta de 18 ani sau începând de la vârsta la care devin active sexual. Ca regulă, acest test trebuie efectuat anual.
• Totuşi, frecvenţa efectuării testului Papanicolau depinde de anumiţi factori. Femeile care au 3 teste Papanicolau negative în 3 ani consecutivi, pot efectua examinarea mai rar (la fiecare 3 ani), în funcţie de starea generală de sănătate şi de activitatea sexuală, şi dacă se află în categoria femeilor cu risc scăzut.
• Femeile cu displazie cervicală, istoric de condiloame genitale şi/sau infecţie HIV, trebuie să efectueze teste Papanicolau mai des, conform recomandărilor medicului.
• După vârsta de 65 ani, testul Babeș-Papanicolau se efectuează conform recomandărilor medicului; testarea poate înceta dacă au existat numeroase teste normale în trecut.
• Femeilor care iau anticoncepţionale orale sau celor cu parteneri sexuali multipli se indică testul Papanicolau obligator în fiecare an.

Pregătirea pentru investigație.

Nu este recomandată efectuarea în perioada menstruației, timp de 72 ore după contact sexual. Nu se efectuează irigaţii vaginale, tratamente vaginale si nu se introduc contraceptive vaginale cu 72 ore înaintea recoltării. Intervalul ideal pentru recoltarea testului Papanicolau este în zilele 10-20 ale ciclului menstrual (ziua 1 este prima zi a menstruaţiei).

NOTĂ:  Testul Papanicolau poate fi efectuat în siguranţă în cursul sarcinii.

Simptomele cancerului de col uterin nu sunt întotdeauna evidente şi este posibil să nu existe niciun semn de alarmă pană cand nu a ajuns la un stadiu avansat. Din această cauză este foarte importantă testarea periodică în vederea depistării anumitor leziuni potențial canceroase și efectuarea cel puțin o dată pe an a testului Babeș-Papanicolau.

• Metodă:Microscopică automatizată
• Material:Raclaj celulelor epiteliale
• Echipament:Microscop Eurostar III Plus
• Servicii conexe recomandate:Human papilloma virus 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 (genotipare) ,Examenul citologic cervico-vaginal (PAP-test pe frotiu, raport conform Bethesda system) ,Secreţie vaginală (identificare bacteriană şi fungică) ,Florocenoza, Test complex ,Prelevarea materialului biologic urogenital la femei

Florocenoză este un test complex de biologie moleculară fiind o soluție de diagnostic creată de către comunitatea științifică ca răspuns la o serie de probleme reale, întâlnite de către medicii clinicieni, survenite în diagnosticul infecțiilor urogenitale. Problema disbalansului microflorei vaginale este una dintre cele mai relevante în practica ginecologică. Modificările microflorei vaginale pot duce la apariția secrețiilor vaginale neplăcute, care sunt reclamate de peste 50% dintre pacienle ce vizitează un medic ginecolog. Eliminările vaginale pot fi cauzate de vaginoza bacteriană (VB), vulvovaginita candidozică (VVC), vaginita aerobă (VA) și infecțiile cu transmitere sexuală (ITS). Mai puțin frecvent, vaginita citolitică, vaginita atrofică, dar și o serie de alți factori fiziologici și patologici duc la apariția eliminărilor vaginale anormale. Disbalansul microflorei vaginale este faorte răspândit. De exemplu, vaginoza bacteriană apare la 30–40% dintre femei, vulvovaginita candidozică - în 20–45% la femeile de vârstă reproductivă. Dezechilibrul microflorei vaginale duce la dezvoltarea unui întreg complex de probleme, care afectează funcția reproductivă a femeilor (boli inflamatorii ale organelor pelvine, risc crescut de apariție a avorturilor spontane tardive, nașteri premature, endometrite post avort etc.). Spre exemplu, conform datelor studiilor efectuate pe populația europeană, prezența dezechilibrului microflorei vaginale crește probabilitatea nașterii premature cu 75%. Abordările terapeutice pentru formele nosologice implicate în apariția dezechilbrului  microflorei vaginale diferă și, prin urmare, succesul tratamentului depinde de diagnosticul corect. Informativitatea datelor obținute de către medicul clinician în timpul examinării este destul de mică ceea ce ține de infecțiile urogenitale. Faptul că nu există semne patognomonice pentru diagnostic a fost descris de mult timp, cu toate acestea, indicatorii scăzuti de sensibilitate diagnostică și specificitatea secrețiilor specifice în diagnosticul vaginozei bacteriene și vulvovaginitei aerobe arată că pentru aceste nosologii este imposibil să se ia o decizie terapică doar pe baza manifestărilor clinice, din acest motiv se prescriu diverse teste de laborator. Cauzele acestor stări pot fi atât afecțiuni mixte, recidivante, dar și infecții tratate în mod repetat.

            De exemplu, afecțiunile inflamatorii și non-inflamatorii mixte sunt foarte frecvente, prin urmare, chiar lipsa semnelor de inflamație a mucoasei vaginale nu exclude vaginoza bacteriană. Pe de altă parte, absența semnelor de inflamație în timpul examinării poate fi considerată ca dovadă a absenței vulvovaginitei candidozice la acest pacient, totuși, trebuie de avut în vedere faptul că concentrațiile scăzute de Candida, care poate să nu conducă la apariția manifestărilor clinice, pot provoca dezvoltarea vulvovaginitei candidozice pe viitor atunci când este prescrisă terapia cu antibiotice, de exemplu pentru tratamentul vaginozei bacteriene sau a infecțiilor sexual transmisibile. Deseori la examinarea pacientelor cu secreții vaginale anormale, pe lângă tabloul clinic, medicul se concentrează și pe rezultatele unui examen microscopic de rutină. Cu toate acestea, sensibilitatea scăzută și subiectivitatea examinării microscopice împiedică diagnosticul corect. Utilizarea metodelor moderne de biologie moleculară face posibilă ridicarea gradului de sensibilitate diagnostică peste pragul de 98%, cu specificitate simultană ridicată a diagnosticului.

            Florocenoza include 5 grupuri de infecții, care permite aprecierea simultană a microflorei vaginale atât calitativ cât și cantitativ. Această investigație reprezintă un test integral, în cadrul căruia agenții patogeni sunt despărțiți în grupuri sindromale:

• Vaginoza bacteriană
• Vaginita aeroba
• Micoplasmele condiționat patogene
• Vulvovaginita candidozică
• Infecții sexual transmisibile

Vaginoza bacteriană reprezintă o vaginită datorată modificărilor complexe ale florei vaginale, în care numărul de lactobacili scade și se observă o creștere excesivă a agenților patogeni anaerobi. Printre simptome se numără eliminări de culoare gri, fluide, cu un miros specific și prurit (mâncărimi). Diagnosticul este confirmat prin investigarea secrețiilor vaginale.

Vaginita aerobă este un alt tip de vaginoză care este cauzată de creșterea numărului microorganismelor aerobe. În esență, aceasta este aceeași ca și binecunoscuta vaginoză bacteriană, numai că în cazul dat, inflamația în vagin este cauzată de bacterii anaerobe. Scăderea rapidă a lactobacililor benefici, care sunt responsabili pentru starea adecvată a microflorei vaginale. În acest context, microorganismele patogene și condițional condiționate încep să se înmulțească.

Vulvovaginita candidozică este cea mai frecventă maladie inflamatorie a vulvei și vaginului. Se remarcă printr-un curs acut și recidivant al bolii. Cel mai adesea, candidoza apare la femeile cu un ciclu menstrual regulat, mult mai rar la femeile aflate în postmenopauză care nu utilizează terapie hormonală care conține estrogen și la fete înainte de începerea menstruației. Vulvovaginita candidozică este provocată de ciuperca Candida, care se localizează de obicei în tractul gastrointestinal, uneori în vagin. Prezența candidei în sine nu provoacă niciun simptom, dar odată cu modificare florei normale a tractului gastrointestinal și a vaginului (din cauza administrării de medicamente sau tulburări în sistemul imunitar), cantitatea de candid poate crește și poate duce la apariția afecțiunii date.

Micoplasmele condiționat patogene sunt cele mai mici procariote autoreplicante, private de un perete celular rigid, limitate la o singură membrană lipoproteică formată din trei straturi. Micoplasmele sunt identificate în prezent ca bacterii. Până în prezent sunt identificate trei specii de micoplasme ca fiind genitale: Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium și Ureaplasma urealyticum. Micoplasmele sunt microorganisme condiționat-patogene, sunt participanți la toate tipurile de microbiocenoză vaginală: reprezentanți normali ai microflorei tractului urogenital, asociați ai vaginozei bacteriene și, în anumite condiții, pot provoca boli acute și cronice: endometrită, salpingită, infecție intrauterină, o cauză a infertilității.

Infecțiile sexual-transmisibile provoacă disconfort și duc la diverse complicații de sănătate a femeilor. Florocenoza conține un grup aparte destinat infecțiilor sexual-transmisibile pentru diagnosticul celor mai frecvente infecții ale grupului NCMT: infecții gonococice, chlamydia, mycoplasma genitalium și trichomonas vaginalis. Problema de diagnostic doar după semnele clinice prezente constă în faptul că toate aceste infecții au simptome similare, astfel că este imposibil de identificat vizual o infecție specifică.

Avantajele testului complex Florocenoza:

1. Este direcționat spre diagnosticarea bolilor infecțioase și inflamatorii, și nu a microorganismelor individuale;
2. Complexul include agenți patogeni implicați în etiologia apariției sindroamelor;
3. Identificarea și diferențierea agenților patogeni care determină tactica terapiei;
4. Formularea concluziei este adaptată Clasificatorul Internațional al Maladiilor, ediția 10;
5. Aceeași sensibilitatea diagnostică pentru totți agenții patogeni (peste 98%);
6. Conținut maxim de informații (din o probă biologică recoltată - screening pentru toate infecțiile semnificative din punct de vedere clinic);
7. Simplitate în recoltarea materialului biologic – raclaj urogenital;
8. Menținerea eficienței metodei de diagnostic pe fundalul semnelor pronunțate de inflamație;
9. Capacitatea de a efectua cercetări în orice zi a ciclului menstrual (cu excepția perioadei hemoragiei menstruale);
10. Posibilitatea efectuării testului în orice trimestru de sarcină;
11. Lipsa condițiilor speciale în timpul transportului și depozitării probelor biologice;
12. Implementarea pe scară largă a metodei în practica de rutină;
13. Validare internațională repetată a tuturor componentelor complexului de diagnostic;

• Metodă:PCR RT/ reacția de polimerizare în lanț în timp-real
• Material:

  Raclaj vaginal

• Echipament:Rotor Gene 6000
• Servicii conexe recomandate:Herpes simplex virus/ Cytomegalovirus (ADN, test cantitativ, raclaj) ,Human papilloma virus 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 (genotipare) ,Secreţie vaginală (identificare bacteriană şi fungică) ,Prelevarea materialului biologic urogenital la femei

   Metoda de diagnosticare prin biologie moleculară PCR Human herpes virus tipul 6 (HHV-6) permite depistarea componentelor genomului HHV-6 în limfocitele sîngelui periferic și alte țesuturi.
Indicații pentru prescrierea testului: 
erupții cutanate la sugari, sindromul de astenie cronică, apariția dupa o febră de scurtă durată a erupțiilor cutanate, mărirea ganglionilor retroauriculari și cervicali, diagnosticul diferențial al infecțiilor (rubeolă, rujeolă, eritem infecțios, infecții enterovirale, otită, meningită, pneumonie bacteriană, erupție cutanată medicamentoasă, sepsis), erupții cutanate herpetiforme, screening cu scop profilactic, stare imunodeficitară.  

• Metodă:PCR RT/ reacția de polimerizare în lanț în timp-real
• Material:Raclaj
• Echipament:7500 Real-Time PCR System
• Servicii conexe recomandate:C.trachomatis, T.vaginalis, N.gonorrhoeae în raclaj (ADN, calitativ) ,C.trachomatis, U.urealyticum, U.parvum, M.genitalium (ADN, calitativ) ,Human papilloma virus 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 (genotipare) ,Prelevarea materialului biologic urogenital la bărbaţi ,Prelevarea materialului biologic urogenital la femei